鑒定試劑盒分為A部分和B部分,共有24項傳統(tǒng)生化測試,微生物的發(fā)酵反應使培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化。待鑒定的菌株應先進行分離純化。從營養(yǎng)瓊脂或胰蛋白酶大豆蛋白胨瓊脂中挑取菌落接種于5ml腦心提取液中,35-37℃培養(yǎng)4-6小時至接種液在620nm處濁度≥0.1od或0.5mcfarland標準。打開無菌套件并撕下密封。每孔50μL上述菌液。接種環(huán)也可用于劃線。35℃-37℃孵育18-24小時。根據(jù)結(jié)果??解釋表格。
鑒定試劑盒即可使用,用戶只需要提供病毒樣本,根據(jù)地黃保守序列設計的特異性引物與相關(guān)病毒無交叉反應。靈敏度可達數(shù)百份/反應。一管熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。該試劑盒足以進行L反應體系的50倍和20倍μ熒光定量PCR。本產(chǎn)品僅適用于科學研究,不能用于臨床診斷。
鑒定試劑盒實驗過程:
1、試劑制備區(qū)、樣品處理區(qū)和PCR擴增區(qū)的整個檢測過程應嚴格按照本手冊的要求進行。各區(qū)實驗服、儀器、耗材應單獨使用,不得混用;實驗采用帶濾芯的吸頭;樣品處理區(qū)應設置生物安全柜,樣品處理應在生物安全柜內(nèi)操作;三區(qū)均應配備紫外線殺菌裝置。
2、為避免RNA降解,樣品處理過程應在0-4℃下進行,實驗結(jié)束后立即進行檢測;樣品處理中使用的儀器和耗材應無核酶處理。
3、每次實驗應設置陰性和陽性對照。
4、試劑盒內(nèi)所有試劑在使用前應在室溫下充分融化混合,并瞬間離心。
5、試劑盒中的所有陰性和陽性對照在使用前應轉(zhuǎn)移到樣品制備區(qū)并分開存放。
6、為防止熒光干擾,避免赤手直接接觸PCR反應管,避免在PCR反應管上做任何標記。
7、儀器放大的相關(guān)參數(shù)按本手冊的相關(guān)要求設置;不同批次的試劑不能混用。
8、在ABI系列熒光定量PCR儀的參數(shù)設置中,沒有選擇Rox校正,也沒有選擇淬滅基因。
9、實驗過程中產(chǎn)生的產(chǎn)品廢棄物,應經(jīng)無害化處理后處理。