英國(guó)OXOID CT0107B 阿米卡星藥敏實(shí)驗(yàn)紙片?說(shuō)明書(shū)

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：英國(guó)OXOID CT0107B 阿米卡星藥敏實(shí)驗(yàn)紙片

英文名稱：Amikacin Susceptibility Test Disc

【包裝規(guī)格】

5×50 片 / 盒

【預(yù)期用途】

本產(chǎn)品旨在通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)檢測(cè)阿米卡星對(duì)細(xì)菌的有效性。有幾種實(shí)驗(yàn)室方法

適用于紙片擴(kuò)散法。用戶應(yīng)當(dāng)參考當(dāng)?shù)氐闹笇?dǎo)原則，獲取關(guān)于培養(yǎng)基的選擇，接

種量，培養(yǎng)條件和抑菌圈判讀標(biāo)準(zhǔn)的詳細(xì)信息。

【檢測(cè)原理】

在濾紙片中滲入一定量的抗生素，然后將紙片貼在事先接種了測(cè)試菌液的瓊

脂平板表面，抗生素?cái)U(kuò)散形成濃度梯度。培養(yǎng)結(jié)束后，檢測(cè)紙片周圍的抑菌圈，

并與特定抗生素產(chǎn)生的認(rèn)可的抑菌圈范圍相比較，就可以判斷細(xì)菌對(duì)抗生素的敏

感程度。

【主要組成成份】

每張紙片直徑 6 毫米，含四環(huán)素 30ug，紙片兩面都清晰印有抗生素編碼縮寫

AK 和劑量 30ug。

需要但未提供的材料

裝有適量培養(yǎng)基的瓊脂平板、接種用的混懸培養(yǎng)基、無(wú)菌接種環(huán)和拭子、無(wú)

菌鑷子、麥?zhǔn)蠞岫葮?biāo)準(zhǔn)液、培養(yǎng)箱、改良的氣體環(huán)境、抗生素紙片分配器、質(zhì)控菌株、

測(cè)量抑菌環(huán)大小的工具，以及當(dāng)?shù)貥?biāo)準(zhǔn)方法的判讀標(biāo)準(zhǔn)。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

未開(kāi)封的塑料管必須存放在 -20℃—8℃，有效期 3 年，直至需要方可取出。

未開(kāi)封的塑料管在開(kāi)封前回復(fù)至室溫以減少冷凝水。塑料管一旦開(kāi)封，需要放置

于分配器內(nèi)保存（請(qǐng)確認(rèn)分配器內(nèi)放置了干燥劑）。分配器在冷藏室中保存，打

開(kāi)前應(yīng)回復(fù)至室溫。如果塑料管不是放置于分配器中，用戶應(yīng)當(dāng)保證紙片保存在

冷藏室中并避免潮濕。一旦塑料管開(kāi)封，建議保存時(shí)間不要超過(guò) 7 天。只適于未

開(kāi)封并在適宜條件下儲(chǔ)存的產(chǎn)品。

【樣本要求】

供試微生物應(yīng)是從培養(yǎng)基中挑取的新鮮的、純的臨床分離株。如有可能，標(biāo)

本應(yīng)在開(kāi)始抗微生物治療前，就從患者處采集。

【檢驗(yàn)方法】

用法：

本品可用于多種標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)方法，其中包括但限于 BSAC、CDS、DIN、

CLSI M2 或 EUCAST。請(qǐng)參考現(xiàn)行的當(dāng)?shù)刂笇?dǎo)原則，獲取關(guān)于培養(yǎng)基的選擇，

接種量和培養(yǎng)條件的詳細(xì)信息。

CLSI 方法小結(jié)：（其它標(biāo)準(zhǔn)會(huì)有差異）

1CN140692

CT0107B

培養(yǎng)基：Mueller-Hinton 瓊脂用于檢測(cè)非苛養(yǎng)微生物。含 5% 羊血的 Mueller

Hinton 用于檢測(cè)腦膜炎奈瑟氏菌和鏈球菌，含 1% 精制生長(zhǎng)添加劑的 GC 瓊脂用

于檢測(cè)淋病奈瑟氏菌，嗜血桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基用于檢測(cè)流感嗜血桿菌和副流感嗜血

桿菌。關(guān)于檢測(cè)其它苛養(yǎng)菌或罕見(jiàn)菌的培養(yǎng)基和生長(zhǎng)條件可參考 CLSI 第 M45 章。

平板培養(yǎng)基和藥敏紙片在使用前要回復(fù)至室溫。平板培養(yǎng)基在接種前不應(yīng)有過(guò)多水分。

供試微生物：采取適當(dāng)?shù)臋z測(cè)方法來(lái)核實(shí)供試微生物的推測(cè)鑒定結(jié)果。采用

直接菌落法或生長(zhǎng)法制備的標(biāo)準(zhǔn)化接種物應(yīng)在 15 分鐘內(nèi)接種到制備好的平板培

養(yǎng)基上：生長(zhǎng)法—用接種環(huán)挑取 3 至 5 個(gè)形態(tài)上相似的獨(dú)立菌落，并移至 4-5ml

的胰蛋白胨大豆肉湯或類似培養(yǎng)基中，在 35℃下培養(yǎng) 2-6 小時(shí)。用無(wú)菌生理鹽

水或肉湯調(diào)整濁度，使之達(dá)到 0.5 個(gè)麥?zhǔn)蠞岫葮?biāo)準(zhǔn)（將 0.5ml 的 0.048M 氯化鋇

[1.175%wt/vol BaCl2.2H2O] 加 到 99.5ml 的 0.18mol/l 硫 酸 [1%vol/vol] 中 ,

制成 0.5 個(gè)麥?zhǔn)蠞岫葮?biāo)準(zhǔn)液—避光保存）。直接菌落法（葡萄球菌和鏈球菌的方法）—在非選擇性瓊脂上挑取分離的菌落，至于無(wú)菌生理鹽水或肉湯中，并

制成等于 0.5 麥?zhǔn)蠞岫葮?biāo)準(zhǔn)的菌懸液。

接種：將無(wú)菌拭子浸入菌懸液中，在試管壁上旋轉(zhuǎn)按壓，擠出多余的培養(yǎng)液。在

平板培養(yǎng)基表面至少沿著三個(gè)方向涂布平板表面。接種后 15 分鐘內(nèi)將藥敏紙片置

于平板上。

藥敏紙片：使用前將藥敏紙片回復(fù)至室溫。單塊平板培養(yǎng)基上放置的藥敏紙片

數(shù)量如下：

在貼上藥敏紙片的 15 分鐘內(nèi)翻轉(zhuǎn)平板，并按照下面的規(guī)定培養(yǎng)：

* 葡萄球菌和腸球菌需要培養(yǎng) 24 小時(shí)。耐甲氧西林的葡萄球菌可能在溫度超過(guò)

35℃的條件無(wú)法檢出。

質(zhì)量控制程序：

建議以適當(dāng)?shù)拈g隔檢測(cè)質(zhì)控菌株；既可在每次檢測(cè)時(shí)進(jìn)行質(zhì)控，也可以根據(jù)國(guó)家

標(biāo)準(zhǔn)機(jī)構(gòu)提供的抗生素敏感性檢測(cè)指南推薦的程序進(jìn)行質(zhì)控。如果某種質(zhì)控菌株檢測(cè)菌

單塊平板推薦的藥敏紙片數(shù)量：

淋病奈瑟氏菌、副流感嗜血桿菌、流感嗜血桿菌和鏈球菌

9 張 /140-150mm 平板，

或者 4 張 /90-100mm 平板

腦膜炎奈瑟氏菌

5 張 /140-150mm 平板，

或者 2 張 /90-100mm 平板

非苛養(yǎng)菌

12 張 /140-150mm 平板，

或者 5 張 /90-100mm 平板

檢測(cè)菌：

培養(yǎng)要求：

流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌

5%CO2,35±2℃，16-18 小時(shí)

淋病奈瑟氏菌

5%CO2,36±1℃，20-24 小時(shí)

腦膜炎奈瑟氏菌

5%CO2,35±2℃，20-24 小時(shí)

非苛養(yǎng)菌 *

需氧，35±2℃，16-18 小時(shí)

鏈球菌

5%CO2,35±2℃，20-24 小時(shí)CN14069

3

CT0107B

在貼上藥敏紙片的 15 分鐘內(nèi)翻轉(zhuǎn)平板，并按照下面的規(guī)定培養(yǎng)：

K．對(duì)于沙門氏菌和志賀氏菌，氨基糖甙類藥物可能在體外具有活性，但在臨床

上卻沒(méi)有效果并且不應(yīng)報(bào)告為敏感。

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

培養(yǎng)后，測(cè)量*抑菌區(qū)域的直徑，讀數(shù)到毫米數(shù)值。抑菌環(huán)的邊緣應(yīng)為肉眼

可以發(fā)現(xiàn)的無(wú)明顯微生物生長(zhǎng)的區(qū)域。對(duì)于血平板，應(yīng)在反射光環(huán)境中對(duì)平板上

表面進(jìn)行判讀（不判讀溶血區(qū)域邊緣，僅包括細(xì)菌生長(zhǎng)邊緣）。所有其他培養(yǎng)基

應(yīng)在黑色背景和反射光環(huán)境中對(duì)平板背面進(jìn)行判讀（葡萄球菌和腸球菌除外，應(yīng)

在透射光下進(jìn)行判讀 - 微弱的生長(zhǎng)提示耐藥）。對(duì)于變形桿菌，應(yīng)忽視明顯抑制

區(qū)域內(nèi)的遷徙性生長(zhǎng)形成的薄膜。對(duì)結(jié)果進(jìn)行判讀的完整說(shuō)明可依照 CLSI 方法

，請(qǐng)參考現(xiàn)行版的 CLSIM100 標(biāo)準(zhǔn)。附表只提供了 CLSI 標(biāo)準(zhǔn)所述的藥物 / 濃度。

【檢驗(yàn)方法的局限性】

本產(chǎn)品供體外診斷使用，僅用于指示供試微生物的體內(nèi)敏感性。選擇何種抗微生

物藥物進(jìn)行測(cè)試和報(bào)告必須由每個(gè)臨床實(shí)驗(yàn)室來(lái)決定。臨床醫(yī)生負(fù)責(zé)決定使用何

種抗生素對(duì)抗供試微生物。

【參考值（參考范圍）】

摘自 CLSI 文件 M100-S20(M02-A10)：“藥敏紙片擴(kuò)散法補(bǔ)充表”抗微生物敏感

性檢測(cè)性能標(biāo)準(zhǔn)。

試驗(yàn)培養(yǎng)物（抑菌環(huán)直徑，mm）

抗生素

藥敏紙片代碼 效價(jià)

耐藥

介于兩者之間 敏感

阿米卡星

AK

30μg

腸桿菌 K、 銅

綠假單胞菌、

不動(dòng)桿菌和葡萄球菌

≤ 14  15-16

≥ 17

針對(duì)一種特定抗生素的結(jié)果超出規(guī)定范圍以外，不得出具患者檢測(cè)報(bào)告，并不應(yīng)

使用該藥敏紙片，直至確定產(chǎn)生差異的原因（如培養(yǎng)基、灌裝量、接種物、培養(yǎng)

條件、質(zhì)控菌株、不適宜的儲(chǔ)存條件或紙片使用不當(dāng)）。

表 1 摘自 CLSI 文件 M100-S20(M02-A10)：“藥敏紙片擴(kuò)散法補(bǔ)充表”抗微生

物敏感性檢測(cè)性能標(biāo)準(zhǔn)。

質(zhì)量菌株（抑菌環(huán)直徑，mm）

【注意事項(xiàng)】

僅供體外診斷使用。遵守使用說(shuō)明。整個(gè)操作過(guò)程中都要采用無(wú)菌技術(shù)并遵守

針對(duì)所有微生物危害建立的預(yù)防措施的規(guī)定。按照生物危害廢棄物操作和處理指

南的指導(dǎo)，必須對(duì)使用后的培養(yǎng)物、容器和其它被污染物進(jìn)行滅菌。勿使用過(guò)期

產(chǎn)品。一旦開(kāi)啟紙筒，需確保其存放在黑暗干燥的環(huán)境中，以防止抗生素降解。

如果紙片在推薦的質(zhì)控菌株培養(yǎng)基上未產(chǎn)生預(yù)期的抑菌環(huán)，需檢查全部操作流程。